磁性α-Fe2O3β-Fe2O3SiO2纳米复合材料固定化青霉素酰化酶的研究
  

编号:99-1439914 | DOC格式 | 2.95M | 35 页

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磁性α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2纳米复合材料固定化青霉素酰化酶的研究
Immobilization of penicillin G acylase on magnetic α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2 nanocomposites

2万字 35页 原创作品,已通过查重系统


摘 要:本文研究磁性α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2纳米复合材料固定化青霉素G酰化酶的过程及固定化酶的性能。筛选固定化的条件,确定最佳固定条件;通过比较游离酶和固定化酶的适应性,得出固定化酶的优势。
在实施酶的固定化过程中,考察了戊二醛用量、pH 值、固定化温度、固定化时间以及给酶量等条件对固定化青霉素酰化酶表观活力、活力回收率等因素的影响。实验所得最优固定化条件为:使用0.2 mL 25%的戊二醛,在pH值为8的缓冲溶液中,酶液用量 0.2 mL,于 37℃下进行18 h的固定化反应,所制固定化酶的表观酶活为196.1 U/g,表观酶活回收率为35%。根据酶固定化反应过程的特点,探索了复合载体固定化酶的作用机理。研究结果表明:复合载体α-Fe2O3/β-Fe2O3/SiO2表面修饰醛基,通过化学键合(Schiff 反应)与物理吸附(酶分子的静电吸引作用)两种作用将酶分子快速、高效地固定在载体上,充分地保持了酶分子的构象,获得了较高活性的固定化酶。为了考察所制固定化酶的性能,测定了游离酶与固定化酶催化反应的最适 pH 值、最适温度、热稳定性、固定化酶的重复使用情况及米氏常数。实验结果表明:游离酶和固定化酶催化反应的最适 pH 值均为 8,最适温度均为 40℃,但固定化酶的PH和温度适应范围要比游离酶宽,具有良好的热稳定性,可以重复利用,重复使用13次,相对酶活仍保留约70%。二者的米氏常数分别为0.506 mol/L和0.02553 mol/L。


关键词:磁性复合载体;青霉素酰化酶;戊二醛;固定化

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